顯微鏡 microscope 向人類展示了一個(gè)全新的微觀世界
【概述】

         由一個(gè)透鏡或幾個(gè)透鏡的組合構(gòu)成的一種光學(xué)儀器，用來(lái)放大微小物體的像。

【顯微鏡的主要構(gòu)造】

         普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造主要分為三部分：機(jī)械部分、照明部分和光學(xué)部分。

        1.機(jī)械部分

         （1）鏡座：是顯微鏡的底座，用以支持整個(gè)鏡體。
         （2）鏡柱：是鏡座上面直立的部分，用以連接鏡座和鏡臂。
         （3）鏡臂：一端連于鏡柱，一端連于鏡筒，是取放顯微鏡時(shí)手握部位。
         （4）鏡筒：連在鏡臂的前上方，鏡筒上端裝有目鏡，下端裝有物鏡轉(zhuǎn)換器。
         （5）物鏡轉(zhuǎn)換器(旋轉(zhuǎn)器)：接于棱鏡殼的下方，可自由轉(zhuǎn)動(dòng)，盤上有3－4個(gè)圓孔，是安裝物鏡部位，轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，可以調(diào)換不同倍數(shù)的物鏡，當(dāng)聽(tīng)到碰叩聲時(shí)，方可進(jìn)行觀察，此時(shí)物鏡光軸恰好對(duì)準(zhǔn)通光孔中心，光路接通。
         （6）鏡臺(tái)(載物臺(tái))：在鏡筒下方，形狀有方、圓兩種，用以放置玻片標(biāo)本，中央有一通光孔，我們所用的顯微鏡其鏡臺(tái)上裝有玻片標(biāo)本推進(jìn)器(推片器)，推進(jìn)器左側(cè)有彈簧夾，用以?shī)A持玻片標(biāo)本，鏡臺(tái)下有推進(jìn)器調(diào)節(jié)輪，可使玻片標(biāo)本作左右、前后方向的移動(dòng)。
         （7）調(diào)節(jié)器：是裝在鏡柱上的大小兩種螺旋，調(diào)節(jié)時(shí)使鏡臺(tái)作上下方向的移動(dòng)。
         ①粗調(diào)節(jié)器(粗螺旋)：大螺旋稱粗調(diào)節(jié)器，移動(dòng)時(shí)可使鏡臺(tái)作快速和較大幅度的升降，所以能迅速調(diào)節(jié)物鏡和標(biāo)本之間的距離使物象呈現(xiàn)于視野中，通常在使用低倍鏡時(shí)，先用粗調(diào)節(jié)器迅速找到物象。
         ②細(xì)調(diào)節(jié)器(細(xì)螺旋)：小螺旋稱細(xì)調(diào)節(jié)器，移動(dòng)時(shí)可使鏡臺(tái)緩慢地升降，多在運(yùn)用高倍鏡時(shí)使用，從而得到更清晰的物象，并借以觀察標(biāo)本的不同層次和不同深度的結(jié)構(gòu)。

        2．照明部分

         裝在鏡臺(tái)下方，包括反光鏡,集光器。
         （1）反光鏡：裝在鏡座上面，可向任意方向轉(zhuǎn)動(dòng)，它有平、凹兩面，其作用是將光源光線反射到聚光器上，再經(jīng)通光孔照明標(biāo)本，凹面鏡聚光作用強(qiáng)，適于光線較弱的時(shí)候使用，平面鏡聚光作用弱，適于光線較強(qiáng)時(shí)使用。
         （2）集光器(聚光器)位于鏡臺(tái)下方的集光器架上，由聚光鏡和光圈組成，其作用是把光線集中到所要觀察的標(biāo)本上。
         ①聚光鏡：由一片或數(shù)片透鏡組成，起匯聚光線的作用，加強(qiáng)對(duì)標(biāo)本的照明，并使光線射入物鏡內(nèi)，鏡柱旁有一調(diào)節(jié)螺旋，轉(zhuǎn)動(dòng)它可升降聚光器，以調(diào)節(jié)視野中光亮度的強(qiáng)弱。
         ②光圈(虹彩光圈)：在聚光鏡下方，由十幾張金屬薄片組成，其外側(cè)伸出一柄，推動(dòng)它可調(diào)節(jié)其開(kāi)孔的大小，以調(diào)節(jié)光量。

         3.光學(xué)部分

         （1）目鏡：裝在鏡筒的上端，通常備有2－3個(gè)，上面刻有5×、10×或15×符號(hào)以表示其放大倍數(shù)，一般裝的是10×的目鏡。
         （2）物鏡：裝在鏡筒下端的旋轉(zhuǎn)器上，一般有3－4個(gè)物鏡，其中zui短的刻有“10×"符號(hào)的為低倍鏡，較長(zhǎng)的刻有“40×"符號(hào)的為高倍鏡，zui長(zhǎng)的刻有“100×"符號(hào)的為油鏡，此外，在高倍鏡和油鏡上還常加有一圈不同顏色的線，以示區(qū)別。
        顯微鏡的放大倍數(shù)是物鏡的放大倍數(shù)與目鏡的放大倍數(shù)的乘積，如物鏡為10×，目鏡為10×，其放大倍數(shù)就為10×10=100。
【英文簡(jiǎn)述】
         a microscope (greek: μικρόν (micron) = small + σκοπεῖν (skopein) = to look at) is an instrument for viewing ob-jects that are too small to be seen by the naked or unaided eye. the science of investigating small ob-jects using such an instrument is called microscopy. the term microscopic means minute or very small, not visible with the eye unless aided by a microscope. the microscopes used in schools and homes trace their history back almost 400 years.

         the first useful microscope was developed in the netherlands in the early 1600s.[citation needed] there is almost as much confusion about the inventor as about the dates. three different eyeglass makers have been given credit for the invention: hans lippershey (who also developed the first real escope); hans janssen; and his son, zacharias.

         the most common type of microscope—and the first to be invented—is the optical microscope. this is an optical instrument containing one or more lenses that produce an enlarged image of an ob-ject placed in the focal plane of the lens(es). there are, however, many other microscope designs.

【顯微鏡的成像原理】        

         當(dāng)把待觀察物體放在物鏡焦點(diǎn)外側(cè)靠近焦點(diǎn)處時(shí)，在物鏡后所成的實(shí)像恰在目鏡焦點(diǎn)內(nèi)側(cè)靠近焦點(diǎn)處，經(jīng)目鏡再次放大成一虛像。觀察到的是經(jīng)兩次放大后的倒立虛像。

【顯微鏡的分類】

        顯微鏡分光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡。
        光學(xué)顯微鏡是在1590年由荷蘭的楊森父子所*。現(xiàn)在的光學(xué)顯微鏡可把物體放大1500倍，分辨的zui小極限達(dá)0.2微米。光學(xué)顯微鏡的種類很多，除一般的外，主要有暗視野顯微鏡一種具有暗視野聚光鏡，從而使照明的光束不從中央部分射入，而從四周射向標(biāo)本的顯微鏡.熒光顯微鏡以紫外線為光源，使被照射的物體發(fā)出熒光的顯微鏡。
        電子顯微鏡是在1931年在德國(guó)柏林由克諾爾和哈羅斯卡首先裝配完成的。這種顯微鏡用高速電子束代替光束。由于電子流的波長(zhǎng)比光波短得多，所以電子顯微鏡的放大倍數(shù)可達(dá)80萬(wàn)倍，分辨的zui小極限達(dá)0.2納米。1963年開(kāi)始使用的掃描電子顯微鏡更可使人看到物體表面的微小結(jié)構(gòu)。
        光學(xué)顯微鏡的分類，根據(jù)照明方法，有透射型與反射(落射)型二種。透射型顯微鏡是應(yīng)用透射照明通過(guò)透明物體的打光方法。反射型顯微鏡是以物鏡上方打光到(落射照明)不透明的物體上。另一種分類方法，系根據(jù)觀察方法的差異，分為明視野顯微鏡、暗視野顯微鏡、相位差顯微鏡、偏光顯微鏡、干涉相位差顯微鏡、熒光顯微鏡等。每種顯微鏡一般又各有透射型和反射型二種。在這些顯微鏡中，特別是明視野顯微鏡是構(gòu)成所有顯微鏡中組成zui基本的基礎(chǔ)。通過(guò)這種顯微鏡觀察的物體，穿過(guò)透過(guò)(吸收)率、反射率，因場(chǎng)所不同而各不相同，這種物體被稱為隨照明光強(qiáng)度(振幅)變化振幅物體，無(wú)色透明物體只有在照明相位改變時(shí)，才能被肉眼觀察到，由於明視野顯微鏡不能改變相位，所以對(duì)透明不染色標(biāo)本不能被觀察到。

         光學(xué)顯微鏡是為了使肉眼看不清楚的標(biāo)本影像，人們?cè)O(shè)想經(jīng)過(guò)一種裝置，使肉眼能夠觀察到該標(biāo)本組織形態(tài)和其間的結(jié)構(gòu)。這種設(shè)想的裝置就被后人創(chuàng)造問(wèn)世了。當(dāng)前廣泛應(yīng)用在各種微小物體的觀察、測(cè)定、分析、分類、鑒定等。在波長(zhǎng)范圍上也不限於可見(jiàn)光波段(4000~7000 )而且(＞2000 )到紅外(1~2u)以及用眼睛觀察、顯微、攝影和一般輻射檢測(cè)器放大。

        顯微鏡的綜合倍率是物鏡倍率g1與目鏡倍率g2的乘積，g＝g1×g2。g1是1~100倍，g2是5~20的范圍。
         數(shù)值孔徑(numerical aperture)n.a.是決定物鏡的分辨率、焦深、圖像亮度的基本數(shù)據(jù)，當(dāng)物鏡焦點(diǎn)對(duì)好后，物鏡前透鏡zui邊緣處的傾斜光線與顯微鏡光軸所交角成α，此即該物鏡的半孔徑角設(shè)標(biāo)本數(shù)據(jù)空間的折射率為n，則n.a.＝n×sinα。
         n通常在空氣中為1，在物鏡與標(biāo)本間浸入水、甘油、油脂時(shí)，該標(biāo)本折射率，即隨浸液不同而異。這種物鏡稱為浸液系物鏡；如是空氣時(shí)，稱為干燥系物鏡。
         在顯微鏡上，限制視野的裝置是視野光圈。以物鏡側(cè)觀看這種視野光圈時(shí)的直徑以mm單位表示的值稱為視野數(shù)。實(shí)際視野＝視野。
         實(shí)際視野＝視野數(shù)／物鏡倍率
         例如，視野數(shù)為20，則10×物鏡就觀看2mm視野范圍。應(yīng)用聚光鏡時(shí)，根據(jù)可變的視野光圈，再?zèng)Q定選用聚光鏡的n.a.值，其值是取決於可變聚光鏡孔徑光圈來(lái)確定。

        顯微鏡的發(fā)明，使人看到了許多以前從未看到過(guò)的生物，如細(xì)菌、病毒等，也使人看到了生物的許多微小結(jié)構(gòu)，如線粒體的結(jié)構(gòu)，從而對(duì)生物學(xué)的發(fā)展起著重要的推動(dòng)作用。顯微鏡是生物學(xué)研究的重要儀器之一。在醫(yī)學(xué)、工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中顯微鏡也有著重要用途，例如在醫(yī)學(xué)診斷上，可對(duì)人血液中的紅細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)等。
         十九世紀(jì)中期，人們發(fā)明了光學(xué)顯微鏡。
         1665年，英國(guó)學(xué)者虎克(robert hooke)設(shè)計(jì)制造了首架光學(xué)顯微鏡，當(dāng)時(shí)放大倍數(shù)為40~140倍，并用此觀察并描述了植物細(xì)胞，同年發(fā)表《顯微圖譜》一書(shū)。
         此后，荷蘭學(xué)者列文·虎克(a。v。leeuwenhoek)用自己設(shè)計(jì)的更*顯微鏡觀察了動(dòng)物細(xì)胞，并描述了細(xì)胞核的形態(tài)。直到今天，光學(xué)顯微技術(shù)已從普通復(fù)式光學(xué)顯微技術(shù)發(fā)展為熒光顯微技術(shù)、共焦點(diǎn)激光掃描顯微鏡技術(shù)、數(shù)字成象顯微鏡技術(shù)、暗場(chǎng)顯微鏡技術(shù)、相差和微分干涉顯微鏡技術(shù)和錄像增加反差顯微鏡技術(shù)等等。
         可見(jiàn)，光學(xué)顯微技術(shù)已成為人類認(rèn)識(shí)微觀世界的必要工具，借助它，使人們認(rèn)識(shí)了細(xì)胞。然而，準(zhǔn)確的理論計(jì)算表明，光學(xué)顯微鏡質(zhì)量無(wú)論無(wú)何改善--不論是用多少組鏡片，使用油鏡頭還是加強(qiáng)光源，放大率至多1000~1500，分辨本領(lǐng)至多 。這就成為人類認(rèn)識(shí)更小的物體：病毒和分子、原子的瓶頸問(wèn)題。
         物理學(xué)家海侖霍爾等人在理論上證明：限制光學(xué)顯微鏡分辨本領(lǐng)及放大率的因素是光的波長(zhǎng)。因而人們轉(zhuǎn)向?qū)ふ乙环N成像媒介--波，它具有可視、可拍攝照片、波長(zhǎng)短、且能用裝置改變波的運(yùn)動(dòng)路線的特點(diǎn)。
         20世紀(jì)初，恰伊斯發(fā)明了紫外光顯微鏡，使分辨率有了大提高 ，這是一次質(zhì)的飛躍，但紫外線仍不是的成像媒介，不能滿足科研和生產(chǎn)需要。
         1926年，德國(guó)科學(xué)家蒲許指出，具有軸對(duì)稱性的磁場(chǎng)對(duì)電子束起著透鏡作用?？上а芯空邲](méi)有考慮到利用它放大物體。
         1932年，柏林科工大學(xué)壓力實(shí)驗(yàn)室的年輕研究員盧斯卡和克諾爾對(duì)陰極射線示波器做了一些改進(jìn)，成功得到放大幾倍后的銅網(wǎng)圖像，這大大鼓舞了人們，確立了電子顯微法。
         1933年底，盧斯卡制成了能放大一萬(wàn)倍的電子顯微鏡，并拍攝了金屬箔和纖維的放大像。使電子顯微鏡的放大倍數(shù)超過(guò)了光學(xué)顯微鏡。
         1937年，柏林科工大學(xué)的克勞塞和穆勒成功的制出了分辨率為納米級(jí)（10-9m）的電子顯微鏡，西門子公司得知后，將主要精力轉(zhuǎn)到適用電子顯微鏡的制造上，并聘請(qǐng)了盧斯進(jìn)行研究。次年，西門子公司*批分辨率為 的電子顯微鏡上市。
         隨后，在人們的研究下，電子顯微鏡的質(zhì)量不斷提高。如今，其分辨率和放大倍數(shù)使人們能更準(zhǔn)確地認(rèn)識(shí)了病毒、分子、原子和夸克。  

【暗視野顯微鏡】

         暗視野顯微鏡由于不將透明光射入直接觀察系統(tǒng)，無(wú)物體時(shí)，視野暗黑，不可能觀察到任何物體，當(dāng)有物體時(shí)，以物體衍射回的光與散射光等在暗的背景中明亮可見(jiàn)。在暗視野觀察物體，照明光大部分被折回，由于物體(標(biāo)本)所在的位置結(jié)構(gòu)，厚度不同，光的散射性，折光等都有很大的變化。

【相位差顯微鏡】

         相位差顯微顯微鏡鏡的結(jié)構(gòu)：
         相位差顯微鏡，是應(yīng)用相位差法的顯微鏡。因此，比通常的顯微鏡要增加下列附件：
         (1) 裝有相位板(相位環(huán)形板)的物鏡，相位差物鏡。
         (2) 附有相位環(huán)(環(huán)形縫板)的聚光鏡，相位差聚光鏡。
         (3) 單色濾光鏡-(綠)。
        各種元件的性能說(shuō)明
         (1) 相位板使直接光的相位移動(dòng) 90°，并且吸收減弱光的強(qiáng)度，在物鏡后焦平面的適當(dāng)位置裝置相位板，相位板必須確保亮度，為使衍射光的影響少一些，相位板做成環(huán)形狀。
         (2) 相位環(huán)(環(huán)狀光圈)是根據(jù)每種物鏡的倍率，而有大小不同，可用轉(zhuǎn)盤器更換。
         (3) 單色濾光鏡系用中心波長(zhǎng)546nm(毫微米)的綠色濾光鏡。通常是用單色濾光鏡入觀察。相位板用特定的波長(zhǎng)，移動(dòng)90°看直接光的相位。當(dāng)需要特定波長(zhǎng)時(shí)，必須選擇適當(dāng)?shù)臑V光鏡，濾光鏡插入后對(duì)比度就提高。此外，相位環(huán)形縫的中心，必須調(diào)整到正確方位后方能操作，對(duì)中望遠(yuǎn)鏡就是起這個(gè)作用部件。

【視頻顯微鏡】

         將傳統(tǒng)的顯微鏡與攝象系統(tǒng)，顯示器或者電腦相結(jié)合，達(dá)到對(duì)被測(cè)物體的放大觀察的目的。
    
         zui早的雛形應(yīng)該是相機(jī)型顯微鏡，將顯微鏡下得到的圖像通過(guò)小孔成象的原理，投影到感光照片上，從而得到圖片?；蛘咧苯訉⒄障鄼C(jī)與顯微鏡對(duì)接，拍攝圖片。隨著ccd攝象機(jī)的興起，顯微鏡可以通過(guò)其將實(shí)時(shí)圖像轉(zhuǎn)移到電視機(jī)或者監(jiān)視器上，直接觀察，同時(shí)也可以通過(guò)相機(jī)拍攝。80年代中期，隨著數(shù)碼產(chǎn)業(yè)以及電腦業(yè)的發(fā)展，顯微鏡的功能也通過(guò)它們得到提升，使其向著更簡(jiǎn)便更容易操作的方面發(fā)展。到了90年代末，半導(dǎo)體行業(yè)的發(fā)展，晶圓要求顯微鏡可以帶來(lái)更加配合的功能，硬件與軟件的結(jié)合，智能化，人性化，使顯微鏡在工業(yè)上有了更大的發(fā)展。

【熒光顯微鏡】

         在熒光顯微鏡上，必須在標(biāo)本的照明光中，選擇出特定波長(zhǎng)的激發(fā)光，以產(chǎn)生螢光，然后必須在激發(fā)光和螢光混合的光線中，單把螢光分離出來(lái)以供觀察。因此，在選擇特定波長(zhǎng)中，濾光鏡系統(tǒng)，成為極其重要的角色。
        熒光顯微鏡原理：
         (a) 光源：光源幅射出各種波長(zhǎng)的光(以紫外至紅外)。
         (b) 激勵(lì)濾光源：透過(guò)能使標(biāo)本產(chǎn)生螢光的特定波長(zhǎng)的光，同時(shí)阻擋對(duì)激發(fā)螢光無(wú)用的光。
         (c) 螢光標(biāo)本：一般用螢光色素染色。
         (d) 阻擋濾光鏡：阻擋掉沒(méi)有被標(biāo)本吸收的激發(fā)光有選擇地透射螢光，在螢光中也有部分波長(zhǎng)被選擇透過(guò)。

【偏光顯微鏡】

        偏光顯微鏡是用于研究所謂透明與不透明各向異性材料的一種顯微鏡。凡具有雙折射的物質(zhì)，在偏光顯微鏡下就能分辨的清楚，當(dāng)然這些物質(zhì)也可用染色法來(lái)進(jìn)行觀察，但有些則不可能，而必須利用偏光顯微鏡。

        （1）偏光顯微鏡的特點(diǎn)

         將普通光改變?yōu)槠窆膺M(jìn)行鏡檢的方法，以鑒別某一物質(zhì)是單折射（各向同行）或雙折射性（各向異性）。雙折射性是晶體的基本特性。因此，偏光顯微鏡被廣泛地應(yīng)用在礦物、化學(xué)等領(lǐng)域，在生物學(xué)和植物學(xué)也有應(yīng)用。

        （2）偏光顯微鏡的基本原理

        偏光顯微鏡的原理比較復(fù)雜，在此不作過(guò)多介紹,偏光顯微鏡必須具備以下附件：起偏鏡，檢偏鏡，補(bǔ)償器或相位片，無(wú)應(yīng)力物鏡，旋轉(zhuǎn)載物臺(tái)。

【超聲波顯微鏡】

         超聲波掃描顯微鏡的特點(diǎn)在于能夠的反映出聲波和微小樣品的彈性介質(zhì)之間的相互作用，并對(duì)從樣品內(nèi)部反饋回來(lái)的信號(hào)進(jìn)行分析！圖像上（c-scan）的每一個(gè)象素對(duì)應(yīng)著從樣品內(nèi)某一特定深度的一個(gè)二維空間坐標(biāo)點(diǎn)上的信號(hào)反饋，具有良好聚焦功能的z.a傳感器同時(shí)能夠發(fā)射和接收聲波信號(hào)。一副完整的圖像就是這樣逐點(diǎn)逐行對(duì)樣品掃描而成的。反射回來(lái)的超聲波被附加了一個(gè)正的或負(fù)的振幅，這樣就可以用信號(hào)傳輸?shù)臅r(shí)間反映樣品的深度。用戶屏幕上的數(shù)字波形展示出接收到的反饋信息（a-scan）。設(shè)置相應(yīng)的門電路，用這種定量的時(shí)間差測(cè)量（反饋時(shí)間顯示），就可以選擇您所要觀察的樣品深度。

【解剖顯微鏡】

         解剖顯微鏡，又被稱為實(shí)體顯微鏡或立體顯微鏡，是為了不同的工作需求所設(shè)計(jì)的顯微鏡。利用解剖顯微鏡觀察時(shí)，進(jìn)入兩眼的光各來(lái)自一個(gè)獨(dú)立的路徑，這兩個(gè)路徑只夾一個(gè)小小的角度，因此在觀察時(shí)，樣品可以呈現(xiàn)立體的樣貌。解剖顯微鏡的光路設(shè)計(jì)有兩種： the greenough concept和the escope concept。解剖顯微鏡常常用在一些固體樣本的表面觀察，或是解剖、鐘表制作和小電路板檢查等工作上。  

醫(yī)學(xué)和生物學(xué)常使用的光學(xué)顯微鏡鏡

有下列12種：
暗視野顯微鏡 在普通光學(xué)顯微鏡臺(tái)下配一個(gè)暗視野聚光器（圖4）,來(lái)自下面光源的光線被拋物面聚光器反射，形成了橫過(guò)顯微鏡視野而不進(jìn)入物鏡的強(qiáng)烈光束。因此視野是暗的，視野中直徑大于 0.3m的微粒將光線散射，其大小和形態(tài)可清楚看到。甚至可看到普通明視野顯微鏡中看不見(jiàn)的幾個(gè)毫微米的微粒。因此在某些細(xì)菌、細(xì)胞等活體檢查中常常使用。

【場(chǎng)發(fā)射掃描電子顯微鏡】
主要用途：   該儀器具有超高分辨率，能做各種固態(tài)樣品表面形貌的二次電子象、反射電子象觀察及圖像處理。 具有高性能x射線能譜儀，能同時(shí)進(jìn)行樣品表層的微區(qū)點(diǎn)線面元素的定性、半定量及定量分析，具有形貌、化學(xué)組分綜合分析能力。    
儀器類別：   03040702 /儀器儀表 /光學(xué)儀器 /電子光學(xué)及離子光學(xué)儀器   
指標(biāo)信息：   二次電子象分辨率：1.5nm 加速電壓：0～30kv 放大倍數(shù)：10-50萬(wàn)倍連續(xù)可調(diào)工作距離：5～35mm連續(xù)可調(diào)傾斜：-5°～45° x射線能譜儀： 分辨率：133ev 分析范圍：b-u    
附件信息：   鍍金鍍炭?jī)x isis圖像處理系統(tǒng)背散射探頭    
場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡，由于分辨率高，為納米材料的研究提供了可靠的實(shí)驗(yàn)手段。另外，對(duì)半導(dǎo)體材料和絕緣體，都能得到滿意的圖像，對(duì)超導(dǎo)薄膜，磁性材料，分子束外延生長(zhǎng)的薄膜材料，半導(dǎo)體材料進(jìn)行了形貌觀察，并對(duì)多種材料進(jìn)行了微區(qū)成份分析，均能得到滿意的結(jié)果  


【顯微鏡的使用方法】

1．低倍鏡的使用方法

（1）取鏡和放置：顯微鏡平時(shí)存放在柜或箱中，用時(shí)從柜中取出，右手緊握鏡臂，左一手托住鏡座,將顯微鏡放在自己左肩前方的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，鏡座后端距桌邊1－2寸為宜，便于坐著操作。

（2）對(duì)光：用拇指和中指移動(dòng)旋轉(zhuǎn)器(切忌手持物鏡移動(dòng))，使低倍鏡對(duì)準(zhǔn)鏡臺(tái)的通光孔(當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)聽(tīng)到碰叩聲時(shí)，說(shuō)明物鏡光軸已對(duì)準(zhǔn)鏡筒中心)。打開(kāi)光圈，上升集光器，并將反光鏡轉(zhuǎn)向光源，以左眼在目鏡上觀察(右眼睜開(kāi)),同時(shí)調(diào)節(jié)反光鏡方向，直到視野內(nèi)的光線均勻明亮為止。

（3）放置玻片標(biāo)本：取一玻片標(biāo)本放在鏡臺(tái)上，一定使有蓋玻片的一面朝上，切不可放反，用推片器彈簧夾夾住，然后旋轉(zhuǎn)推片器螺旋，將所要觀察的部位調(diào)到通光孔的正中。

（4）調(diào)節(jié)焦距：以左手按逆時(shí)針?lè)较蜣D(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺(tái)緩慢地上升至物鏡距標(biāo)本片約5毫米處，應(yīng)注意在上升鏡臺(tái)時(shí)，切勿在目鏡上觀察。一定要從右側(cè)看著鏡臺(tái)上升，以免上升過(guò)多，造成鏡頭或標(biāo)本片的損壞。然后，兩眼同時(shí)睜開(kāi)，用左眼在目鏡上觀察，左手順時(shí)針?lè)较蚓徛D(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使鏡臺(tái)緩慢下降，直到視野中出現(xiàn)清晰的物象為止。

如果物象不在視野中心，可調(diào)節(jié)推片器將其調(diào)到中心(注意移動(dòng)玻片的方向與視野物象移動(dòng)的方向是相反的)。如果視野內(nèi)的亮度不合適，可通過(guò)升降集光器的位置或開(kāi)閉光圈的大小來(lái)調(diào)節(jié)，如果在調(diào)節(jié)焦距時(shí)，鏡臺(tái)下降已超過(guò)工作距離(>5.40mm)而未見(jiàn)到物象，說(shuō)明此次操作失敗，則應(yīng)重新操作，切不可心急而盲目地上升鏡臺(tái)。

2．高倍鏡的使用方法

（1）選好目標(biāo)：一定要先在低倍鏡下把需進(jìn)一步觀察的部位調(diào)到中心，同時(shí)把物象調(diào)節(jié)到zui清晰的程度，才能進(jìn)行高倍鏡的觀察。

（2）轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，調(diào)換上高倍鏡頭，轉(zhuǎn)換高倍鏡時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)速度要慢，并從側(cè)面進(jìn)行觀察(防止高倍鏡頭碰撞玻片)，如高倍鏡頭碰到玻片，說(shuō)明低倍鏡的焦距沒(méi)有調(diào)好，應(yīng)重新操作。

（3）調(diào)節(jié)焦距：轉(zhuǎn)換好高倍鏡后，用左眼在目鏡上觀察，此時(shí)一般能見(jiàn)到一個(gè)不太清楚的物象，可將細(xì)調(diào)節(jié)器的螺旋逆時(shí)針移動(dòng)約0.5－1圈，即可獲得清晰的物象(切勿用粗調(diào)節(jié)器!)

如果視野的亮度不合適，可用集光器和光圈加以調(diào)節(jié)，如果需要更換玻片標(biāo)本時(shí)，必須順時(shí)針(切勿轉(zhuǎn)錯(cuò)方向)轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器使鏡臺(tái)下降，方可取下玻片標(biāo)本。

【顯微鏡使用的注意事項(xiàng)】  

1．持鏡時(shí)必須是右手握臂、左手托座的姿勢(shì)，不可單手提取，以免零件脫落或碰撞到其它地方。

2．輕拿輕放，不可把顯微鏡放置在實(shí)驗(yàn)臺(tái)的邊緣，以免碰翻落地。

3．保持顯微鏡的清潔，光學(xué)和照明部分只能用擦鏡紙擦拭，切忌口吹手抹或用布擦，機(jī)械部分用布擦拭。

4．水滴、酒精或其它藥品切勿接觸鏡頭和鏡臺(tái)，如果沾污應(yīng)立即擦凈。

5．放置玻片標(biāo)本時(shí)要對(duì)準(zhǔn)通光孔中央，且不能反放玻片，防止壓壞玻片或碰壞物鏡。

6．要養(yǎng)成兩眼同時(shí)睜開(kāi)的習(xí)慣，以左眼觀察視野，右眼用以繪圖。

7．不要隨意取下目鏡，以防止塵土落入物鏡，也不要任意拆卸各種零件，以防損壞。

8．使用完畢后，必須復(fù)原才能放回鏡箱內(nèi)，其步驟是：取下標(biāo)本片，轉(zhuǎn)動(dòng)旋轉(zhuǎn)器使鏡頭離開(kāi)通光孔，下降鏡臺(tái)，平放反光鏡，下降集光器(但不要接觸反光鏡)、關(guān)閉光圈，推片器回位，蓋上綢布和外罩，放回實(shí)驗(yàn)臺(tái)柜內(nèi)。zui后填寫使用登記表。(注：反光鏡通常應(yīng)垂直放，但有時(shí)因集光器沒(méi)提至應(yīng)有高度，鏡臺(tái)下降時(shí)會(huì)碰壞光圈，所以這里改為平放)

【顯微鏡的發(fā)展史】

早在公元前一世紀(jì)，人們就已發(fā)現(xiàn)通過(guò)球形透明物體去觀察微小物體時(shí)，可以使其放大成像。后來(lái)逐漸對(duì)球形玻璃表面能使物體放大成像的規(guī)律有了認(rèn)識(shí)。

1590年，荷蘭和意大利的眼鏡制造者已經(jīng)造出類似顯微鏡的放大儀器。


1611年
kepler(克卜勒)：提議復(fù)合式顯微鏡的制作方式。

1655年
hooke(虎克)：「細(xì)胞」名詞的由來(lái)便由虎克利用復(fù)合式顯微鏡觀察軟木塞上某區(qū)域中的微小氣孔而得來(lái)的。

1674年
leeuwenhoek(李文赫克)：發(fā)現(xiàn)原生動(dòng)物學(xué)的報(bào)導(dǎo)問(wèn)世，并于九年后成為*發(fā)現(xiàn)「細(xì)菌」存在的人。

1833年
brown(布朗)：在顯微鏡下觀察紫羅蘭，隨后發(fā)表他對(duì)細(xì)胞核的詳細(xì)論述。

1838年
schlieden and schwann(雪萊敦及史汪)：皆提倡細(xì)胞學(xué)原理，其主旨即為「有核細(xì)胞是所有動(dòng)植物的組織及功能之基本元素」。

1857年
kolliker(寇利克)：發(fā)現(xiàn)肌肉細(xì)胞中之粒線體。

1876年
abbe(阿比)：剖析影像在顯微鏡中成像時(shí)所產(chǎn)生的繞射作用，試圖設(shè)計(jì)出的顯微鏡。

1879年
flrmming(佛萊明)：發(fā)現(xiàn)了當(dāng)動(dòng)物細(xì)胞在進(jìn)行有絲分裂時(shí)，其染色體的活動(dòng)是清晰可見(jiàn)的。

1881年
retziue(芮祖)：動(dòng)物組織報(bào)告問(wèn)世，此項(xiàng)發(fā)表在當(dāng)世尚無(wú)人能*逾越。然而在20年后，卻有以cajal(卡嘉爾)為首的一群組織學(xué)家發(fā)展出顯微鏡染色觀察法，此舉為日后的顯微解剖學(xué)立下了基礎(chǔ)。

1882年
koch(寇克)：利用苯安染料將微生物組織進(jìn)行染色，由此他發(fā)現(xiàn)了霍亂及結(jié)核桿菌。往后20年間，其它的細(xì)菌學(xué)家，像是klebs and pasteur(克萊柏和帕斯特)則是藉由顯微鏡下檢視染色藥品而證實(shí)許多疾病的病因。

1886年
zeiss(蔡氏)：打破一般可見(jiàn)光理論上的極限，他的發(fā)明--阿比式及其它一系列的鏡頭為顯微學(xué)者另辟一新的解像天地。

1898年
golgi(高爾基)：*發(fā)現(xiàn)細(xì)菌中高爾基體的顯微學(xué)家。他將細(xì)胞用硝酸銀染色而成就了人類細(xì)胞研究上的一大步。

1924年
lacassagne(蘭卡辛)：與其實(shí)驗(yàn)工作伙伴共同發(fā)展出放射線照相法，這項(xiàng)發(fā)明便是利用放射性釙元素來(lái)探查生物標(biāo)本。

1930年
lebedeff(萊比戴衛(wèi))：設(shè)計(jì)并搭配*架干涉顯微鏡。另外由zernicke(卓尼柯)在1932年發(fā)明出相位差顯微鏡，兩人將傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡延伸發(fā)展出來(lái)的相位差觀察使生物學(xué)家得以觀察染色活細(xì)胞上的種種細(xì)節(jié)。

1941年
coons(昆氏)：將抗體加上螢光染劑用以偵測(cè)細(xì)胞抗原。

1952年
nomarski(諾馬斯基)：發(fā)明干涉相位差光學(xué)系統(tǒng)。此項(xiàng)發(fā)明不僅享有權(quán)并以本人命名之。

1981年
allen and inoue(艾倫及艾紐)：將光學(xué)顯微原理上的影像增強(qiáng)對(duì)比，發(fā)展趨于境界。

1988年
confocal(共軛焦)掃瞄顯微鏡在市場(chǎng)上被廣為使用。
規(guī)格： 技術(shù)參數(shù)：
1、目鏡：wf10x/18mm
2、無(wú)窮遠(yuǎn)平場(chǎng)消色差物鏡：
4x、10x、20x（選購(gòu)）、40x、80x（選購(gòu)）
數(shù)值孔徑：0.1、0.25、0.40、0.60、0.90
工作距離（mm）：25.4、11.0、3.7、0.2
3、轉(zhuǎn)換器：四孔轉(zhuǎn)換器
4、載物臺(tái)：雙層活動(dòng)平臺(tái)，尺寸150×140mm，移動(dòng)范圍75×50mm
5、照明：柯拉照明，垂直照明系統(tǒng)帶孔徑可變光欄和視場(chǎng)可變光欄；反射光照明，6v20w鹵素?zé)簦炼瓤烧{(diào)
6、濾色片：藍(lán)色、綠色、黃色 、磨砂玻璃片
7、焦距調(diào)節(jié)：同軸粗微調(diào)焦機(jī)構(gòu)
8、具體的構(gòu)造和使用：顯微鏡的構(gòu)造和使用：【1】構(gòu)造：粗準(zhǔn)焦螺旋（升降鏡筒）、細(xì)準(zhǔn)焦螺旋（升降鏡筒）、鏡臂（鏈接）、鏡柱（支持）、目鏡（放大物象）、鏡筒（連接目鏡與物鏡）、轉(zhuǎn)換器（調(diào)換物鏡）、物鏡（放大物象）、載物臺(tái)（放置玻片）、通光孔（光線通過(guò)）、壓片夾（固定玻片）、遮光器（調(diào)節(jié)光線強(qiáng)弱）、反光鏡（反射光線）、鏡座（支持）
2、使用注意事項(xiàng)：【1】一手握鏡臂，一手托鏡座。防止略偏左的離試驗(yàn)臺(tái)邊緣7cm 處
                  【2】先使用低倍物鏡，zui大光圈，用左眼看
                  【3】看到的是倒立的放大的虛像。放大倍數(shù)是目鏡放大倍數(shù)×物鏡放大倍數(shù)